Diagnosis Penyakit Genetik: Peluang dan Prospek

Diagnosis Penyakit Genetik: Peluang dan Prospek

I. Asas diagnostik genetik

Diagnostik genetik adalah satu set kaedah yang bertujuan untuk mengenal pasti perubahan dalam bahan genetik manusia (DNA dan RNA) yang berkaitan dengan penyakit keturunan atau kecenderungan kepada mereka. Kaedah ini membolehkan anda mengenal pasti mutasi, keabnormalan kromosom dan variasi genetik lain yang boleh menyebabkan perkembangan penyakit. Bidang diagnosis genetik berkembang pesat, menawarkan kaedah yang lebih tepat dan lebih tepat untuk mengenal pasti gangguan genetik pada pelbagai peringkat kehidupan – dari zaman pranatal hingga dewasa.

1.1. Bahan Genetik: DNA, RNA dan Kromosom

Unsur utama diagnostik genetik adalah pemahaman tentang struktur dan fungsi bahan genetik. DNA (asid deoxyribonucleic) adalah molekul yang membawa maklumat genetik yang dikodkan dalam urutan nukleotida (adenin, thyme, guanine dan sitosin). DNA dianjurkan dalam struktur yang dipanggil kromosom, yang terletak di teras setiap sel. Seseorang mempunyai 23 pasang kromosom yang diwarisi dari ibu bapa, sejumlah 46 kromosom. RNA (asid ribonucleic) memainkan peranan penting dalam pelaksanaan maklumat genetik yang dikodkan dalam DNA. Jenis RNA yang berbeza terlibat dalam proses transkripsi (sintesis RNA berdasarkan DNA) dan siaran (sintesis protein berasaskan RNA). Mutasi dalam DNA atau RNA, serta perubahan dalam struktur atau kuantiti kromosom boleh membawa kepada perkembangan penyakit genetik.

1.2. Mutasi: Jenis dan Akibat

Mutasi adalah perubahan dalam urutan DNA. Mereka boleh menjadi spontan atau disebabkan oleh pengaruh faktor persekitaran (contohnya, radiasi, bahan kimia). Mutasi boleh berbeza -beza mengikut saiz dan kesan.

• Mutasi tertentu: Penggantian, palam atau makanan istimewa nukleotida.

  • Penggantian (penggantian): Satu nukleotida digantikan oleh yang lain. Ini boleh membawa kepada:
    • Missens-mutacii: Perubahan kodon membawa kepada kemasukan asid amino lain dalam protein. Kesannya boleh berbeza – dari sedikit pengaruh kepada kehilangan lengkap fungsi protein.
    • Tidak masuk akal: Perubahan dalam codon membawa kepada pembentukan stop-codon, yang secara awal menghentikan sintesis protein. Protein biasanya tidak berfungsi.
    • Mutasi senyap: Perubahan dalam kodon tidak menjejaskan urutan asid amino protein akibat degenerasi kod genetik.
  • Kemasukan: Menambah satu atau lebih nukleotida.
  • Penghapusan (penghapusan): Mengeluarkan satu atau lebih nukleotida. Sisipan dan penghapusan, bilangan yang bukannya berganda tiga, menyebabkan pergeseran bingkai baca.

• Frameshift Sisipan atau delegasi nukleotida, tidak mengalikan tiga, mengubah pembaca kod genetik, yang membawa kepada sintesis protein dengan urutan asid amino yang berubah, yang biasanya tidak berfungsi.

• Perbuatan dan duplikasi besar: Penyingkiran atau menggandakan kawasan besar DNA yang mengandungi beberapa gen.

• Pencerobohan: Tapak DNA bertukar 180 darjah.

• Translocations: Pemindahan tapak DNA dari satu kromosom ke yang lain.

• Mutasi di kawasan DNA yang tidak mengodkan: Mutasi di kawasan pengawalseliaan DNA (contohnya, promoter, penambah) boleh menjejaskan ekspresi gen. Mutasi dalam intron (kawasan bukan gen) boleh menjejaskan percikan RNA.

Akibat mutasi bergantung kepada jenis, penyetempatan dan fungsi gen yang terjejas. Sesetengah mutasi tidak mempunyai pengaruh (mutasi neutral), sementara yang lain boleh menyebabkan penyakit yang serius.

1.3. Keabnormalan Kromosom: Jenis dan Kesan Kesihatan

Keabnormalan kromosom adalah perubahan dalam jumlah atau struktur kromosom.

• Aneuloididid: Perubahan bilangan kromosom (contohnya, trisomi – kehadiran kromosom tambahan, monosomi – ketiadaan satu kromosom). Contoh: Trisomi 21 (sindrom Down), trisomi 18 (sindrom Edwards), trisomi 13 (sindrom Patau), monosomi X (sindrom Turner).

• Keabnormalan struktur kromosom:

  • Penghantaran: Kehilangan sebahagian daripada kromosom.
  • Duplikasi: Menggandakan sebahagian daripada kromosom.
  • Pencerobohan: Rampasan kuasa tapak kromosom adalah 180 darjah.
  • Translocations: Pertukaran kawasan antara kromosom bukan humor.
  • Cincin-kromosom: Kromosom membentuk cincin.
  • Isochromosomes: Kromosom terdiri daripada dua bahu yang sama (sama ada dua atau dua panjang).

Keabnormalan kromosom sering membawa kepada gangguan perkembangan yang serius dan pelbagai penyakit.

1.4. Keturunan: Autosomal Dominan, Autosomal-Recestive, X-bersaiz X-saiz warisan

Jenis warisan penyakit genetik menentukan kemungkinan pemindahannya dari ibu bapa kepada anak -anak. Jenis warisan utama:

• Autosomal dominan: Penyakit ini ditunjukkan dengan kehadiran satu salinan gen mutan pada autosom (bukan kromosom seksual). Dalam ibu bapa yang sakit, kebarangkalian memindahkan gen mutan kepada anak -anak adalah 50%. Contoh: Neurofibromatosis, Ahondroplasia.

• Autosoma-Rispektif: Penyakit ini menunjukkan dirinya hanya dengan kehadiran dua salinan gen mutan pada autosom. Kedua -dua ibu bapa harus menjadi pembawa mutasi (biasanya tanpa gejala). Kebarangkalian kelahiran anak yang sakit dalam dua media adalah 25%, kebarangkalian medium yang sihat adalah 50%, kebarangkalian anak yang sihat tanpa mutasi adalah 25%. Contoh: Fibrosis sista, phenylketonuria, atrofi otot tulang belakang.

• Dominan X-arnented: Penyakit ini ditunjukkan dengan kehadiran satu salinan gen mutan pada kromosom X. Pada wanita yang mempunyai penyakit dominan yang berkaitan dengan X, kebarangkalian memindahkan mutasi kepada anak-anak adalah 50% tanpa mengira jantina kanak-kanak. Pada lelaki dengan penyakit dominan X-arus, semua anak perempuan akan sakit, dan anak-anak mereka sihat.

• Resesif X-suling: Penyakit ini ditunjukkan pada lelaki dengan kehadiran satu salinan gen mutan pada X-kromosom. Pada wanita, penyakit ini menunjukkan dirinya hanya dengan kehadiran dua salinan gen mutan pada X-kromosom (yang jarang berlaku). Pembawa wanita mutasi pada kromosom X mempunyai kebarangkalian 50% untuk memindahkan mutasi kepada anak-anak mereka (yang akan sakit) dan kebarangkalian 50% memindahkan mutasi kepada anak-anak perempuan (yang akan menjadi pembawa). Lelaki dengan penyakit resesif yang berkaitan dengan X tidak menyampaikan mutasi kepada anak-anak mereka, tetapi menyampaikannya kepada semua anak perempuan (yang akan menjadi pembawa). Contoh: hemofilia, dyushenna distrofi.

• Y-set: Penyakit ini hanya disebarkan dari bapa kepada anak lelaki, kerana gen mutan berada pada kromosom Y.

• Warisan mitokondria: Mitokondria mengandungi DNA mereka sendiri. Penyakit mitokondria hanya dihantar dari ibu kepada anak -anak, kerana spermatozoa praktikal tidak mengandungi mitokondria.

Ii. Kaedah diagnostik genetik

Diagnostik genetik menggunakan pelbagai kaedah yang bertujuan untuk mengenal pasti perubahan genetik pada tahap yang berbeza – dari analisis nukleotida individu kepada kajian kromosom keseluruhan.

2.1. Kaedah Cytogenetic

Kaedah sitogenetik mengkaji struktur dan kuantiti kromosom.

• Cariotipirani: Analisis set sel kromosom. Sel ditanam, kromosom dicat dan difoto, dan kemudian dianalisis di bawah mikroskop. Cariotyping membolehkan anda mengenal pasti aneuploidies, anomali struktur besar dalam kromosom (penghapusan, duplikasi, translocations, inversions). Cariotal adalah “standard emas” untuk mengesan keabnormalan kromosom, tetapi mempunyai resolusi terhad dan tidak membenarkan untuk mengenal pasti perubahan genetik kecil.

• Hibridisasi situ pendarfluor (Ikan): Kaedah berdasarkan penggunaan zond DNA, yang dibentangkan oleh pewarna neon, yang dilengkapi dengan kawasan kromosom tertentu. Ikan membolehkan anda mengenal pasti keabnormalan kromosom tertentu (contohnya, penghapusan, duplikasi, translocation) dan menentukan penyetempatan gen pada kromosom. Ikan mempunyai resolusi yang lebih tinggi daripada carutping, dan boleh digunakan untuk mengesan anomali kromosom kecil. Pelbagai pilihan ikan (contohnya, m-fish, langit) membolehkan anda menganalisis semua kromosom secara serentak.

• Analisis mikrus kromosom (CMA): Kaedah berdasarkan hibridisasi pesakit dengan microtrota yang mengandungi beribu -ribu zon DNA yang mewakili pelbagai bahagian genom. CMA membolehkan anda mengenal pasti penghapusan kecil dan duplikasi (variasi nombor salinan – CNV) dengan ketepatan yang tinggi. CMA tidak mendedahkan translocations dan penyongsangan seimbang. CMA adalah kaedah pilihan untuk mengesan CNV untuk kelewatan perkembangan, autisme dan anomali kongenital.

2.2. Kaedah genetik molekul

Kaedah genetik molekul menganalisis urutan DNA dan RNA.

• Reaksi rantai polimerase (PCR): Kaedah penguatan (peningkatan berganda) seksyen DNA tertentu. PCR digunakan untuk menyediakan DNA untuk analisis lanjut (contohnya, penjujukan). Pelbagai pilihan PCR (contohnya, PCR-qPCR kuantitatif, transcriptase PCR-RT-PCR) membolehkan anda menentukan jumlah DNA atau RNA dalam sampel.

• Penjujukan DNA: Penentuan urutan nukleotida dalam DNA. Kaedah penjujukan yang berbeza (contohnya, penjujukan pada Sanger, penjujukan generasi baru – NGS) membolehkan anda menganalisis gen individu, gen (panel gen) atau keseluruhan genom (penjujukan penuh Gas – WGS).

  • Penjujukan Sequencing Sanger: Kaedah penjujukan “klasik”, yang membolehkan anda menentukan urutan DNA dengan ketepatan yang tinggi. Ia digunakan untuk mengesahkan hasil NGS dan untuk menguakkan kawasan kecil DNA.
  • Penjujukan Generasi Baru (NGS): Kaedah penjujukan prestasi tinggi yang membolehkan secara serentak menganalisis berjuta -juta serpihan DNA. NGS digunakan untuk penjujukan gen, gen, panel exomal (semua gen pengekodan) dan keseluruhan genom. NGS membolehkan anda mengenal pasti pelbagai jenis mutasi (mutasi titik, sisipan, penghapusan, penghapusan besar dan duplikasi).
    • Penjujukan yang disasarkan: Sequencing gen tertentu atau bahagian genom yang berkaitan dengan penyakit tertentu. Digunakan untuk mendiagnosis penyakit genetik yang diketahui.
    • EXOM Sequencing (Exome Sequencing): Sequencing semua bahagian pengekodan gen (Exoma). Ia digunakan untuk mengenal pasti punca penyakit genetik apabila kaedah lain tidak memberikan hasil.
    • Penjujukan genom penuh): Penjujukan keseluruhan genom. Memberi maklumat yang paling lengkap mengenai bahan genetik manusia. Ia digunakan untuk penyelidikan saintifik dan untuk mendiagnosis penyakit genetik yang jarang dan kompleks.

• Penguatan Probe Ligated Multiplex (MLPA): Kaedah yang digunakan untuk mengenal pasti hentian dan duplikasi dalam DNA. MLPA membolehkan anda menganalisis beberapa bahagian DNA secara serentak.

• Analisis serpihan DNA (analisis serpihan): Kaedah yang digunakan untuk menentukan saiz serpihan DNA. Ia digunakan untuk menganalisis pengulangan mikrosatelit (contohnya, dalam diagnosis pengembangan pengulangan trinucleotide).

• Digital Drip PCR (DDPCR): Kaedah PCR kuantitatif, yang membolehkan anda menentukan secara tepat jumlah DNA atau RNA dalam sampel. DDPCR digunakan untuk mengesan mutasi yang jarang berlaku dan memantau penyakit sisa minimum dalam kanser.

2.3. Kaedah biokimia

Kaedah biokimia menganalisis kepekatan bahan -bahan tertentu dalam darah, air kencing atau cecair biologi yang lain. Kaedah ini boleh digunakan untuk mendiagnosis penyakit metabolik (contohnya, phenylketonuria, galactosemia). Hasil analisis biokimia mungkin menunjukkan keperluan untuk ujian genetik.

Iii. Skop diagnostik genetik

Diagnosis genetik digunakan dalam pelbagai bidang perubatan.

3.1. Diagnostik pranatal

Diagnosis pranatal dijalankan semasa kehamilan untuk mengesan penyakit genetik pada janin.

• Pemeriksaan trimester pertama: Ujian gabungan, termasuk pemeriksaan ultrasound (pengukuran ketebalan ruang kolar) dan ujian darah biokimia ibu (penentuan tahap Papp-A dan β-HCG percuma). Pemeriksaan trimester pertama membolehkan anda menilai risiko anomali kromosom (contohnya, sindrom Down, sindrom Edwards, sindrom Patau).

• Pemeriksaan trimester kedua: Analisis biokimia darah ibu (penentuan tahap AFP, HCG, Estriol dan Inhibin A). Pemeriksaan trimester kedua membolehkan anda menilai risiko kecacatan dalam tiub saraf (contohnya, Spina bifida) dan keabnormalan kromosom.

• Ujian Pranatal Bukan -Ivasive (NIPT): Analisis DNA janin yang beredar dalam darah ibu. NIPT membolehkan anda mengenal pasti keabnormalan kromosom (contohnya, sindrom Down, sindrom Edwards, sindrom Patau, dan anneuloid yang tinggi) dengan ketepatan yang tinggi. NIPT adalah kaedah yang lebih tepat daripada pemeriksaan trimester pertama dan kedua, dan mengelakkan prosedur invasif.

• Kaedah invasif diagnosis pranatal:

  • Amniocentez: Mendapatkan sampel cecair amniotik (mengelilingi janin) menggunakan jarum. Amniocentesis biasanya dilakukan pada 15-18 minggu kehamilan. Cecair amniotik mengandungi sel -sel janin yang boleh digunakan untuk karyotyping, ikan, CMA dan ujian genetik molekul. Risiko komplikasi amniosentesis adalah kira-kira 0.5-1%.
  • Biopsi Chorion: Mendapatkan sampel chorion villi (plasenta masa depan) menggunakan jarum atau kateter. Biopsi Chorion biasanya dilakukan pada 10-12 minggu kehamilan. Villi chorion mengandungi sel -sel janin yang boleh digunakan untuk ujian genetik cariotyping, ikan, CMA dan molekul. Risiko komplikasi biopsi chorion adalah kira-kira 1-2%.
  • Cordocentesis: Mendapatkan sampel darah janin dari urat umbilik menggunakan jarum. Cordocentesis biasanya dilakukan selepas 18 minggu kehamilan. Cordocentesis jarang digunakan, terutamanya untuk diagnosis jangkitan janin dan untuk kajian hematologi. Risiko komplikasi cordocentesis lebih tinggi daripada amniosenthesis dan biopsi choriona.

3.2. Diagnostik Genetik Preimplantation (PGD)

PGD ​​dijalankan semasa persenyawaan in vitro (ECO) untuk mengesan penyakit genetik dalam embrio sebelum implantasi mereka di rahim. Satu atau lebih sel (blastomer) diambil dari embrio pada peringkat awal pembangunan (biasanya pada hari ke -3 atau ke -5). Sel -sel embrio dianalisis menggunakan ujian genetik cariotyping, ikan, CMA atau molekul. Embrions yang tidak mempunyai gangguan genetik dipindahkan ke rahim. PGD ​​membolehkan anda mengurangkan risiko kelahiran kanak -kanak dengan penyakit genetik. PGD ​​ditunjukkan kepada pasangan dengan risiko tinggi kanak -kanak dengan penyakit genetik (contohnya, pembawa translocations kromosom, pasangan dengan penyakit keturunan dalam keluarga).

3.3. Diagnosis penyakit keturunan pada kanak -kanak dan orang dewasa

Diagnostik genetik digunakan untuk mengesahkan diagnosis penyakit keturunan pada kanak -kanak dan orang dewasa, untuk menentukan jenis mutasi, untuk meramalkan perjalanan penyakit dan perancangan rawatan. Ujian genetik boleh ditunjukkan dengan kehadiran tanda -tanda dan gejala berikut: kelewatan perkembangan, keterbelakangan mental, anomali kongenital, kelemahan otot, kekejangan, gangguan metabolik, perkembangan awal kanser. Kaunseling genetik membantu pesakit dan keluarga mereka memahami hasil ujian genetik dan membuat keputusan yang munasabah mengenai rawatan dan pencegahan.

3.4. Farmakogenetik

Farmakogenetik mengkaji kesan variasi genetik terhadap tindak balas seseorang terhadap ubat -ubatan. Ujian genetik boleh digunakan untuk menentukan dos ubat yang paling berkesan dan untuk mengesan pesakit yang telah meningkatkan risiko kesan sampingan. Farmakogenetik membolehkan anda memperibadikan rawatan dan meningkatkan keberkesanan dan keselamatannya.

3.5. Onkogenetik

Onkogenetik mengkaji peranan faktor genetik dalam perkembangan kanser. Ujian genetik boleh digunakan untuk mengenal pasti kecenderungan keturunan kanser (contohnya, mutasi dalam gen BRCA1 dan BRCA2 yang meningkatkan risiko mengembangkan kanser payudara dan kanser ovari), untuk mendiagnosis kanser, untuk menentukan prognosis penyakit dan perancangan rawatan. Terapi yang disasarkan (rawatan yang bertujuan untuk sasaran molekul tertentu dalam sel -sel tumor) adalah berdasarkan hasil ujian genetik.

3.6. Ujian Genealogi (Genealogi DNA)

Ujian genealogi membolehkan anda menentukan asal etnik, mencari saudara -mara dan mengkaji sejarah keluarga berdasarkan analisis DNA. Ujian silsilah menjadi semakin popular, tetapi penting untuk mengingati kerahsiaan maklumat genetik.

Iv. Aspek etika dan sosial diagnostik genetik

Diagnosis genetik menimbulkan isu etika dan sosial yang penting.

4.1. Kerahsiaan maklumat genetik

Maklumat genetik adalah sulit dan mesti dilindungi dari akses yang tidak dibenarkan. Adalah perlu untuk mematuhi peraturan kerahsiaan semasa ujian genetik, penyimpanan dan penggunaan maklumat genetik. Banyak negara mempunyai undang -undang yang melindungi maklumat genetik dari diskriminasi dalam bidang insurans dan pekerjaan.

4.2. Kaunseling Genetik

Kaunseling genetik memainkan peranan penting dalam diagnosis genetik. Perunding genetik membantu pesakit dan keluarga mereka memahami hasil ujian genetik, menilai risiko membangunkan penyakit genetik, membuat keputusan yang munasabah mengenai rawatan dan pencegahan, serta mengatasi akibat psikologi dan emosi ujian genetik.

4.3. Diskriminasi berdasarkan maklumat genetik

Terdapat risiko diskriminasi berdasarkan maklumat genetik dalam bidang insurans, pekerjaan dan bidang lain. Adalah perlu untuk membangun dan melaksanakan undang -undang yang melindungi orang dari diskriminasi genetik.

4.4. Ketersediaan diagnostik genetik

Diagnostik genetik harus tersedia untuk semua orang yang memerlukannya, tanpa mengira status sosio-ekonomi mereka. Adalah perlu untuk mengurangkan kos ujian genetik dan mengembangkan akses kepada kaunseling genetik.

4.5. Isu etika diagnosis pranatal dan PGD

Diagnosis pranatal dan PGD menimbulkan isu etika yang kompleks yang berkaitan dengan pemilihan embrio dan penamatan kehamilan. Adalah perlu untuk menjalankan perbincangan umum mengenai isu -isu ini dan membangunkan garis panduan etika.

V. Prospek untuk pembangunan diagnostik genetik

Diagnostik genetik terus berkembang pesat, membuka peluang baru untuk pencegahan, diagnosis dan rawatan penyakit genetik.

5.1. Pembangunan teknologi penjujukan generasi baru

Teknologi NGS menjadi lebih cepat, murah dan tepat. Penjujukan penuh menjadi lebih berpatutan dan boleh menjadi kaedah diagnostik rutin pada masa akan datang. Kaedah baru data penjujukan sedang dibangunkan untuk mengenal pasti pilihan genetik yang kompleks dan meramalkan risiko membangunkan penyakit.

5.2. Pembangunan kaedah penyuntingan genom (CRISPR-Cas9)

Teknologi CRISPR-Cas9 membolehkan anda mengedit genom ketepatan yang tinggi. Teknologi ini mempunyai potensi besar untuk rawatan penyakit genetik, tetapi juga menimbulkan isu etika yang penting. Ujian klinikal kaedah mengedit genom untuk rawatan penyakit genetik sudah dijalankan.

5.3. Perkembangan bioinformatik dan kecerdasan buatan

Bioinformatik dan kecerdasan buatan memainkan peranan yang semakin penting dalam analisis data genetik. Algoritma pembelajaran mesin sedang dibangunkan yang membolehkan anda mengenal pasti corak data genetik dan meramalkan risiko penyakit. Kecerdasan buatan dapat membantu doktor mentafsirkan hasil ujian genetik dan membuat keputusan rawatan.

5.4. Pembangunan ubat yang diperibadikan

Maklumat genetik memainkan peranan penting dalam pembangunan perubatan yang diperibadikan. Ujian genetik boleh digunakan untuk menentukan rawatan yang paling berkesan untuk setiap pesakit. Perubatan yang diperibadikan membolehkan anda meningkatkan keberkesanan rawatan dan mengurangkan risiko kesan sampingan.

5.5. Memperluas penggunaan diagnosis genetik dalam pencegahan penyakit

Diagnostik genetik boleh digunakan untuk mengenal pasti orang yang mempunyai risiko peningkatan penyakit tertentu (contohnya, kanser, penyakit kardiovaskular, diabetes). Pengenalpastian awal kecenderungan genetik terhadap penyakit membolehkan langkah -langkah pencegahan dan mengurangkan risiko perkembangan mereka.

5.6. Pembangunan kaedah penyampaian gen

Kaedah baru untuk menyampaikan gen ke sel sedang dibangunkan, yang akan merawat penyakit genetik menggunakan terapi genetik. Terapi umum terdiri daripada memperkenalkan salinan fungsional gen ke dalam badan pesakit, yang bermutasi. Ujian klinikal terapi genetik untuk rawatan pelbagai penyakit genetik dilakukan dengan hasil yang menggalakkan.

5.7. Pembangunan kaedah diagnostik yang tidak berleluasa

Kaedah diagnostik bukan -invasive sedang dibangunkan untuk mengesan penyakit genetik tanpa prosedur invasif (contohnya, analisis DNA dalam air liur, air kencing atau darah). Kaedah diagnostik bukan -invasive lebih selamat dan lebih mudah untuk pesakit.

5.8. Pembangunan Telemedicine dan Kaunseling Jauh

Telemedicine dan kaunseling jauh membolehkan anda mengembangkan akses kepada diagnosis genetik dan kaunseling genetik, terutamanya untuk pesakit yang tinggal di kawasan terpencil.

Vi. Kesimpulan (dalam kes ini, diturunkan, mengikut syarat -syarat tugas)

Kesimpulannya, diagnosis genetik adalah alat yang berkuasa yang boleh digunakan untuk meningkatkan kesihatan manusia. Perkembangan teknologi diagnostik genetik dan pengembangan penggunaannya dalam pelbagai bidang perubatan membuka peluang baru untuk pencegahan, diagnosis dan rawatan penyakit genetik. Adalah penting untuk mengingati aspek etika dan sosial diagnostik genetik dan membangunkan undang -undang dan garis panduan yang melindungi hak pesakit.